Este estudio evaluó el uso de ecografía con contraste mejorado (CEUS) para medir la perfusión sanguínea en los músculos esqueléticos de perros sanos. CEUS permitió evaluar de manera confiable la perfusión muscular y generar curvas de tiempo de intensidad para cuantificar parámetros como el pico de intensidad, el área bajo la curva y el tiempo al pico. Los valores medios de estos parámetros no fueron significativamente diferentes entre las cuatro regiones musculares examinadas. CEUS demostró ser más sensible que

1. Fractura ósea puede curar a través directa o indirecta
proceso de acuerdo con la estabilidad y la brecha entre el
fragmentos [7, 10]. Aunque algunas características incluyendo
la fractura ósea, disminución de la brecha entre los fragmentos,
callos dispositivos de formación y de fijación pueden ser evaluados en
radiografía, la neovascularización y la perfusión de sangre en el
sitio de la fractura, que son uno de los factores más importantes para
curación de fracturas, no se puede estimar [19]. Debido a que el hueso
cambios siguen después de suministro de sangre en la curación de fracturas, que
la hipótesis de que la perfusión de los tejidos blandos circundantes puede
ser utilizado como un indicador temprano de los cambios hemodinámicos durante
curación del hueso. Varios estudios previos poder discutir
Doppler, resonancia magnética realzada con contraste dinámico
formación de imágenes y la gammagrafía han informado de que la evaluación de la
neovascularización puede ser útil para predecir si el
condición es hacia la curación normal de las fracturas, unión retardada
o falta de unión [4, 6, 33, 36, 37]. Contraste mejorado ecografía
(CEUS) puede detectar el flujo de sangre con un volumen bajo y
velocidad lenta en vasos más pequeños a través de señales armónicas
de un agente de contraste de microburbujas en tiempo real después de la inyección
el medio de contraste [15]. Perfusión sanguínea dinámico puede
ser visualmente evaluados basándose en la señal brillante formado por
agente de contraste a un índice mecánico bajo. Además, la sangre
velocidad y el volumen se pueden evaluar cuantitativamente basan en
el tiempo - curva de intensidad (TIC) genera a partir de CEUS.
En medicina veterinaria, las evaluaciones cuantitativas usando
el TIC en CEUS se han aplicado a varios órganos, incluyendo el hígado canino [3, 23-
25], el bazo [26], los ganglios linfáticos
[40], la glándula suprarrenal [28, 29], riñón [8, 13, 39], páncreas
[14, 32] y tumores superficiales [27]. La neovascularización es
uno de los factores más importantes para la curación de la fractura. Por lo tanto,
microcirculación en los músculos esqueléticos se puede utilizar como una
indicador temprano de los cambios hemodinámicos durante la fractura
curación. Sin embargo, ningún estudio ha aplicado CEUS a esquelética
músculos de la medicina veterinaria. Aunque la aplicación de CEUS
a las regiones del aparato locomotor está empezando incluso en los seres humanos,
CEUS se ha utilizado para evaluar la perfusión del músculo esquelético
en diversas condiciones, incluyendo lesión muscular aguda, periférica
enfermedad arterial, diabetes mellitus con arterial periférica
enfermedad y la isquemia y también en óseo y osseocutaneous
colgajos libres [1, 2, 5, 9, 11, 16-18, 21, 22, 30, 31].
Este estudio se realizó para establecer el protocolo de
contraste mejorado la ecografía para el blando circundante
el tejido de los miembros torácicos y pélvicos como un estudio preliminar para
la estimación de la perfusión en los músculos esqueléticos de los casos de fractura.
En los parámetros cuantitativos de CEUS, la intensidad máxima
(PI) y el área bajo la curva (AUC) representado por la sangre
volumen, y el tiempo hasta el pico de intensidad (TP) representados por
velocity.MATERIALS y métodos de sangre
Ocho 2-3 años de edad, beagles varones (media de peso corporal;

2. 10,51 ± 1,48 kg, rango; Se utilizaron 09.07 a 11.05 kg). Todos los perros
eran clínicamente sana basada en un examen físico,
hemograma completo, bioquímica, análisis de orina, torácica
y radiografía abdominal y ecografía abdominal.
Hubo hallazgos anodinos en lateral y craneocaudal
radiografías de miembros torácicos y pélvicos. Los perros
fueron alojados individualmente y se proporcionaron comercial
alimentos y agua ad libitum.
Después de un rápido hr 24, los perros recibieron inyecciones intramusculares de una
combinación de 1,5 mg / kg zolazepam / tiletamina
(Zoletil, Virbac, Carros, Francia) y 0,03 mg / kg de medetomidina
(Domitor, Orion Corp., Espoo, Finlandia). Presión sanguínea
fue grabado antes y después de la anestesia.
La ecografía en modo B convencional y CEUS fueron
realizado en húmero izquierdo, radio, fémur y la tibia usando
el mismo equipo y sonda de ultrasonido lineal 10 MHz
(ProSound Alpha 7, Aloka, Tokio, Japón). El perro era
colocado en una posición de decúbito lateral derecho, y cada examen
extremidad se extendió hacia el operador y se sujeta. Un convencional
Examen en modo B se realizó para localizar el
escanear región de CEUS. El transductor se coloca sobre
el plano lateral de la articulación del hombro a la diáfisis humeral
proximal cubierta por el músculo tríceps; el lateral
avión de la metáfisis radial proximal a la diáfisis
proximal cubierto por el extensor común de los dedos
muscular y distalmente por el músculo abductor largo del pulgar;
el plano lateral de la articulación de la rodilla a la diáfisis femoral
proximal cubierta por el músculo tensor de la fascia lata y
distalmente por el músculo vasto lateral; o el plano lateral
de la articulación de la rodilla a la diáfisis tibial proximal cubierta
por los cranialis tibial, respectivamente. La imagen longitudinal
de cada superficie de hueso incluyendo el músculo se muestra en una
supervisar, con el posicionamiento de modo que la metáfisis proximal
estaba a la derecha y la diáfisis estaba a la izquierda. Color
La ecografía Doppler se realizó para evaluar la
presencia de vasos. En segundo lugar se realizaron armónicos más altos
en el modo de detección armónica pura extendida para
CEUS. La energía transmitida se redujo a una magnitud
de 7% con un índice mecánico 0,07. Profundidad de intrusión era
ajustado a 2.0-3.5 cm para visualizar el músculo de acuerdo con la
regiones apendicular. La frecuencia de repetición de pulso era
ajustado a 15 Hz con un valor de ganancia del 61%. Medio de contraste (SonoVue,
Bracco, Milán, Italia) fue administrado por bolo
inyección en la vena cefálica a través de una llave de paso de tres vías
y un catéter intravenoso de calibre 20. A 0,5 ml (2,5 mg) o
1 ml (5 mg) de medio de contraste se inyectó a través de un 1 ml
jeringa en cada perro, seguido inmediatamente por una inyección en bolo
de 5 ml de solución salina. Al mismo tiempo, secuencias dinámicas
se almacenaron durante un máximo de 110 segundos, manteniendo el transductor en
la misma ubicación. CEUS se completó en todos los perros dentro de

3. 2 hr después de abrir la botella medio de contraste, y el contraste
medio se agitó antes de la inyección en otros perros.
Una sola región apendicular fue examinado en cada perro en
el mismo día, y las otras regiones fueron examinados en 2-día
intervalos. Todo CEUS fue realizada por un examinador (OJY),
y evaluaciones cuantitativas y cualitativas de todos CEUS
se llevaron a cabo tres veces por dos revisores (OJY, JSH)
cegado a la región explorada. Todos los bucles de cine dinámicos fueron
evaluado mediante el software instalado (SOP-ALPHA7-14,
Aloka), que muestra la intensidad acústica de acuerdo
a tiempo. Región de interés (ROI) en forma de arco de 1,1 ×
2,9 mm se definió manualmente sobre el músculo para adquirir
el TIC. Corrección de movimiento se realizó manualmente marco
por cuadro. Correspondientes parámetros cuantitativos de la
TIC, incluyendo PI, AUC y TP, se obtuvieron de ROI.
PI se midió con la mayor intensidad acústica. TP era
definida como la duración desde el inicio de la inyección de agente de contraste a PI.
AUC se calculó como el área de la TIC usando
la integración.
El protocolo utilizado en este estudio fue aprobado por el Animal
Cuidado y el empleo Comisión de la Universidad Nacional Chonnam,
y los animales fueron cuidados de acuerdo con la
Directrices para Experimentación Animal de Chonnam Nacional
Universidad.
Se realizó un análisis estadístico mediante el programa SPSS
programa estadístico (SPSS Statistics Versión 21, IBM Corp.,
Armonk, NY, EE.UU.). Análisis de reproducibilidad entre
los colaboradores se realizó mediante la correlación intra-clase
prueba de coeficiente (CPI). CPI valores fueron evaluados por el
criterios: escasa fiabilidad, <0,4; regular a buena, 0,4 a 0,75; y excelente,
> 0,75 [35]. El análisis de medidas repetidas de la varianza
se utilizó para investigar la reproducibilidad intra e inter
coeficientes de los parámetros TIC incluyendo PI, TP y AUC
y los coeficientes de reproducibilidad inter de puntuación de la vascularización
entre cuatro regiones apendiculares en perros normales. Una p <0,05
fue considerado significativo para todos los análisis. Los datos son reportados
como media ± desviación estándar.
RESULTADOS
La presión arterial media en ocho perros fue 145,5 ±
7,52 mmHg antes de la anestesia y 126,38 ± 5,90 mmHg después
anestesia. Aumento transitorio de intensidad vascular y luego
desaparición se observó fácilmente de todos los músculos esqueléticos
después de inyectar el medio de contraste (Fig. 1). La perfusión de la sangre
del músculo esquelético se evaluó de forma fiable utilizando CEUS.
Un total de 1.711 marcos de CEUS se obtuvieron de retorno de la inversión
más de 110 seg, y una forma parabólica típica de las TIC era
generado a partir del área del músculo (Fig. 2). Los valores medios de PI,
AUC y TP medida desde el músculo no fueron significativamente
diferente entre las cuatro regiones apendiculares (Tabla 1). No
diferencia significativa en las intensidades medias de los picos, las áreas bajo

4. se observó la curva o TP dentro de cada músculo esquelético
de las cuatro regiones, de acuerdo con la dosis de medio de contraste.
En el análisis cuantitativo, la intra e inter-reproducibilidad significa
coeficientes de PI, AUC y TP están representados
en la Tabla 2.
DISCUSIÓN
La evaluación de la perfusión sanguínea sea significativo para predecir el pronóstico
o controlar la progresión de la curación de fracturas. La formación de imágenes
modalidad tiene que ser lo suficientemente sensible para detectar la baja perfusión
para una evaluación precisa del flujo sanguíneo en el músculo, porque
la perfusión del músculo esquelético normal es muy baja en reposo [41].
El medio de contraste de ultrasonidos, en principio, se mantiene estrictamente
por vía intravascular, y cada uno solo de microburbujas de contraste
medio puede ser detectada usando CEUS, independiente de la velocidad
y el volumen de flujo de sangre [5]. Midió el volumen de sangre
con CEUS tiene una correlación positiva con histológico
capilarización [41]. Por lo tanto, CEUS tiene la capacidad para evaluar
la perfusión del músculo esquelético con precisión no sólo en reposo bajo
condiciones normales, sino también en la curación de fracturas. Una segunda
generación
agente de contraste fue seleccionada en este estudio, porque
este agente recubierto con gas inerte es más estable ya que permite la persistencia en el
torrente sanguíneo de primera generación
agentes recubiertos con aire. El tamaño de hexafluoruro de azufre lleno-
microburbujas es uniforme en este medio de contraste, y esto
agente ha prolongado y excelente estabilidad con un tiempo vial
de 6 horas y media de tiempo de 6 minutos en la sangre periférica [27]. En
contraste con los agentes de contraste de primera generación que se convierten
perturbado y liberar una gran cantidad de emisión acústica
en un alto índice mecánico, imágenes bajo índice mecánico
usando agentes de segunda generación minimiza el microburbujas
estallar para mejorar el efecto de contraste no lineal y produce una
oscilación que prevé frecuencias armónicas para una duración más larga [27]. Estos
agentes de contraste no destructivos
permitir la continua formación de imágenes en tiempo real y cuantitativa
evaluación de la perfusión de sangre por análisis TIC.
Los valores medios de PI y AUC representan el volumen de sangre,
y TP determina la velocidad de la sangre [12]. PI y AUC
en el músculo esquelético tendió a ser mayor en el húmero y
fémur que aquellos en el radio y la tibia, pero no significativa
se observó diferencia. TP en los miembros torácicos tendía a
ser más rápida (aproximadamente 4 min) que en las extremidades pélvicas;
Sin embargo, no hay diferencia significativa entre los 4 regiones
fue observado. Por lo tanto, el volumen de sangre y la velocidad en el músculo
esquelético no fueron significativamente diferentes en el 4 apendicular
regiones. La puntuación de la vascularización en el músculo esquelético era
cualitativamente evaluados. Aunque un análisis estadístico no era
realizado en este estudio, CEUS parecía ser más sensible
de Doppler color para la detección de pequeños vasos y la baja en la sangre
velocidades, porque CEUS mostraron señales de buques distintos, no

5. presentado imagen Doppler color por en el músculo esquelético. Además,
no hay artefactos-Doppler específica, como aliasing
y florece en CEUS. Trauma del tejido blando y severa
trastornos circulatorios son una de las causas comunes de
impedimento para la curación del hueso con éxito, porque la fractura
El sitio se suministra inicialmente sangre por la angiogénesis extraóseo.
Además, un daño excesivo a los nutrientes y los vasos del periostio
pasando por plomo hueso cortical al retraso en la unión [34].
Por lo tanto, el análisis cuantitativo de TIC muscular, esquelético
vascularización podría proporcionar información pronóstica temprana
sobre la curación de fracturas.
El efecto de la dosis sobre la perfusión de los músculos esqueléticos era
investigado. Un protocolo estándar para el uso de agente de contraste en
músculo esquelético no está establecida, incluso en los seres humanos, y muchos
diferentes dosis, tales como 2,4 ml, 4,8 ml y 5 ml, con diversas
métodos de inyección, incluyendo inyección en bolo y continuo
tasa de infusión se han aplicado [1, 2, 9, 11, 16-18, 20]. En
el presente estudio, no hubo diferencia significativa en PI,
AUC o TP entre las dos dosis. Por consiguiente, 0,5 ml de
medio de contraste puede ser más práctico para evaluar esquelético
la perfusión del músculo.
En general, los medios de contraste ecográficos son seguros y
bien tolerado [27]. En este estudio, no hubo efecto secundario
con CEUS usando SonoVue en perros. Todos los valores de TIC incluyendo
PI, AUC y TP tenían igualmente una alta reproducibilidad. CEUS
era método de imagen segura, no invasiva con un examen corto
veces. Además, la evaluación cuantitativa de esquelético
la perfusión del músculo usando los valores TIC tenía precisión y objetividad
con alta reproducibilidad. Hay algunas limitaciones en este estudio. En primer lugar,
este estudio se realizó bajo anestesia general
anestesia, y la sangre volumen y la velocidad pueden ser diferentes
de las de los pacientes sin anestesia [38]. El farmacológica
efectos de los anestésicos en sí puede influir en las TIC
valores [38]. En un estudio anterior, el efecto vasodilatador de anestésicos
presión alteración local de la sangre y el ritmo cardíaco, y TP
en el hígado estaba a punto 11.6 segundos más rápido en los perros sin anestesia
que para aquellos con anestesia [23]. En segundo lugar, era difícil
para evaluar la perfusión de sangre con precisión en algunas áreas musculares
que contiene fascia, ligamentos y tendones, porque muestran
hiperintensidad.
Aunque hubo algunas limitaciones, se espera que CEUS
ser una excelente modalidad para evaluar los cambios de la sangre
la perfusión en el músculo esquelético. Este estudio proporcionado cuantitativa
valor de referencia de la perfusión muscular, incluida la sangre
volumen y la velocidad en los perros normales. Una alícuota de 0,5 ml contraste
Se sugiere medio como una dosis práctico para evaluar
el músculo esquelético. El protocolo para evaluar la CEUS
la perfusión sanguínea de los músculos esqueléticos se puede utilizar como información
básica
para otros estudios que evalúan la perfusión sanguínea

6. de los músculos esqueléticos en varios estados patológicos incluidos
fractura de hueso usando CEUS.
AGRADECIMIENTOS. Este estudio fue apoyado, en parte,
por el Programa de Investigación de la Ciencia Básica a través de la Investigación
Nacional
Fundación de Corea (NRF), financiado por el Ministerio de
Educación, Ciencia y Tecnología (2012R1A1A1040407)
y el Instituto Médico Animal de Chonnam Nacional Uni

7. de los músculos esqueléticos en varios estados patológicos incluidos
fractura de hueso usando CEUS.
AGRADECIMIENTOS. Este estudio fue apoyado, en parte,
por el Programa de Investigación de la Ciencia Básica a través de la Investigación
Nacional
Fundación de Corea (NRF), financiado por el Ministerio de
Educación, Ciencia y Tecnología (2012R1A1A1040407)
y el Instituto Médico Animal de Chonnam Nacional Uni