Dépistage de la CRP

1. PROTEINE -C- REACTIVE
Abdsalah
(CRP)
Réaction d’agglutination au
LATEX
Par S / Abdessemed

2. Abdsalah
Définition
• Synthétisée principalement par le foie,
sa demi-vie est de 6 heures.
• Nommée ainsi parce qu'elle est
précipitable par un polysaccharide
extrait de la capsule du pneumocoque.
• C'est un examen biochimique sensible,
précoce, non spécifique.

3. • Il n'existe pas de déficit congénital
connu de cette molécule.
• Elle migre dans les béta ou gamma-globulines
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à l'électrophorèse.
• Le tracé n'est le plus souvent pas
modifié lorsque la CRP est < à 100.

4. • C'est une protéine de l'inflammation,
dont le taux peut être multiplié par 500
à 1000 lors d'inflammations aiguës.
• Sa valeur normale est inférieure à 10-12
mg/l.
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5. • Dans le cadre des infections, la CRP
reste normale en cas de virose. Elle ne
s'élève qu'en cas d'infection
bactérienne et diminue rapidement dans
les 48 heures d'une antibiothérapie bien
conduite
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6. • L'élévation du taux de CRP est
également un facteur pronostic: plus
l'élévation est rapide et importante,
plus l'inflammation est sévère
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7. Abdsalah
Principe
• Le test PCR- Latex est un test
d’agglutination rapide pour la détection
directe et semi quantitative sur carte de
protéine C- réactive (PCR).
• Le réactif, est une suspension de
particules de latex recouvertes
d’anticorps anti- PCR humaine, qui
s’agglutinent en présence de PCR dans le
sérum des patients.

8. Abdsalah
Réactifs
• PCR- Latex. Suspension de particules
de latex recouvertes d’anticorps anti-
PCR humaine, azide de sodium 0.95 g/l.
la préparation est calibrée de manière à
détecter entre 6mg/L et 250 mg/L de
PCR.
• Contrôle positif. Sérum humain, azide
de sodium 0,95 g/l.
• Contrôle négatif. Sérum animal, azide
de sodium 0,95 g/l.

9. • Matériel:
- Agitateur réglable à 100 r.p.m
- Cartes tests
- Agitateurs à usage unique
• Echantillon:
- Sérum : stable pendant 48h à 2-8°C.
- Les sérums hémolysés et lipémiques ne
sont pas adéquats pour le test ; ils
risquent de donner des résultats erronés.
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10. Abdsalah
PROTOCOLE
• Préalablement, sortir les réactifs et les
laisser s’équilibrer à la température de
la pièce
• Déposer 50μl d’échantillon et une goutte
de chaque contrôle dans les cercles
individualisés sur la carte test.

11. • Agiter légèrement le flacon de latex
avant de l’utiliser.
• Déposer une goutte de réactif PCR- Latex
dans chaque cercle près de l’échantillon à
tester.
• Mélanger avec un agitateur à usage unique
de manière à recouvrir totalement l’ère
définie par le cercle. Utiliser un nouvel
agitateur pour chaque échantillon.
• Faire tourner la carte à 100 r.p.m. pendant
2 minutes
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12. Lecture et Interprétation
• Aprés avoir retiré la carte de l’agitateur
rotatif, examiner à l’oeil nu la présence ou
l’absence d’agglutination dans la minute
qui suit,
• Une agglutination
visible indique la
présence de
protéine -C-réactive
≥ 6mg/L
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13. • Un sérum positif doit être titré. Pour
titrer. Faire des dilutions sériées de
deux en deux dans une solution saline à
9 g /l.
• le titre d’un sérum est défini comme
étant la plus grande dilution donnant un
résultat positif.
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14. • La concentration approximative d’un
sérum en PCR (mg /L) peut être obtenu
en multipliant le titre par la limite de
sensibilité (6mg/L).
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15. C'est l'association à la VS
de 3 protéines de la
réaction inflammatoire qui
permet de diagnostiquer,
quantifier, dater et suivre la
réaction inflammatoire en
couplant une protéine de
cinétique rapide ( CRP) et
deux protéines à cinétique
lente (ORO et HTP )
L'exemple du schéma associé ( septicémie à E.Coli chez une femme de
40 ans ) montre que alors que la VS n'est pas encore modifiée à J 10,
le profil protéique confirme la guérison clinique
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16. Apprécier l'ancienneté de
la réaction inflammatoire
Les différences de
cinétique des 3 protéines
permettent de
différencier les réactions
aigués des réactions
chroniques
---- La CRP synthétisée
dés la 8ème heure atteint
sa concentration maximum
en 24 heures.
---- L'orosomucoïde et
l'haptoglobine sont
décalées d'environ 24
heures.
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17. Abdsalah
Limites de la Méthode
• Des facteurs rhumatoïdes dans
l’échantillon interfèrent dans le dosage
de la protéine C- réactive.
• L’interférence est éliminée (< 125UI/ml)
à l’aide d’un absorbant.
• Ajouter1 goutte d’absorbant sur chaque
échantillon avant de déposer le latex.

18. Abdsalah
NOTES
• la sensibilité du test diminue à basse
température. Les meilleurs résultats
sont obtenus à des températures
supérieures à 10°C.
• une lecture différée peut résulter en
une surestimation du titre de PCR.
• L’importance de l’agglutination n’est pas
indicatrice de la concentration en PCR
dans les échantillons testés

19. • les sérums contenant de fortes
concentrations de protéine - C- réactive
peuvent donner des réactions
faussement négatives (effet de pro
zone).
• il est conseillé de retester tous les
échantillons négatifs en n’utilisant que
10μl de l’échantillon
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20. Abdsalah