numération des globules blancs

1. SS//AAbbddeessseemmeedd
La numération des
globules blancs
Par S / Abdessemed

2. S/Abdessemed
But
• Déterminer le nombre de GB présent
dans un volume de sang total, soit le
nombre de GB contenu dans un litre de
sang.

3. S/Abdessemed
Principe
• Le comptage au microscope optique à
l’état frais des GB contenus dans un
volume précis de sang dilué.
• Le diluant utilisé est le lazarus qui lyse
les érythrocytes et laisse les leucocytes
intactes.

4. S/Abdessemed
Réactifs
 Lazarus :
• Bleu de méthylène……………………0,25g
• Acide acétique………………………..5 ml
• Eau distillé………………………qsp : 100 ml
 Le bleu de méthylène est censé colorer les noyaux
des leucocytes.
En réalité, cette coloration n’est pratiquement pas
observable et reste inutile du fait de la réfringence
des GB .en fait la coloration de la solution à l’avantage
de la différencier du liquide de marcano
 Sang veineux ou capillaire recueilli sur EDTA.

5. Matériel  Pipette de
S/Abdessemed
dilution de
Potain pour
GB (la bille
est blanche)
 Hématimètre
de malassez
 microscope

6. S/Abdessemed
Technique
• bien agiter le flacon de sang.
• La dilution se fait dans la pipette qui est
au 1/20 (380μl de lazarus +20μl de sang).
• Homogénéiser le contenu de la pipette
de la même manière que pour les GR.
• Laisser reposer 2 à 3minutes pour
permettre aux globules de se déposer.
• Compter le nombre de GB présent dans 4
bandes (l’écart ne doit pas dépasser 10
éléments)

7. S/Abdessemed
Calcul
GB/mm3 = N/4 x 20 x10
N : le nombre compté dans les 4 bandes.
• 20 : le coefficient de dilution.
• 10 : le nombre de bandes dans
l’hématimètre

8. S/Abdessemed
Valeurs normales
Adultes………………………….4.0 à 10x103 /mm3
Nouveau né……………………9.0 à 30x103/mm3
Enfant à1 an…………………6.0 à 17,5 x103/mm3

9. Variations physiologiques
• Plusieurs facteurs peuvent faire varier
le nombre de GB, tels l’âge, l’effort, le
stress, etc.
• Le nombre de GB est normalement plus
élevé à la naissance qu’a l’âge adulte
S/Abdessemed

10. • Au repos physique et mental complet, on
a pu observer un chiffre plus bas de GB
que celui que l’on retrouve au cours des
activités quotidiennes normales, des
efforts intenses peuvent produire une
hausse significative pouvant atteindre
des chiffres voisins de 15 x 103 /mm3
dans l’heure qui suit l’exercice.
S/Abdessemed

11. S/Abdessemed
Valeurs pathologiques
On peut observer une augmentation des GB
ou hyperleucocytose soit réactionnelle : dans
les infections bactériennes (à Cocci surtout).
dans certaines intoxications (plomb, mercure
etc.), Lors du choc opératoire, etc.,
Soit maligne : par prolifération des cellules
d’une ou plusieurs lignées de la moelle
(leucémie) avec ou sans défaut de
maturation.

12. • On trouve une diminution du nombre de
GB ou leucopénie lors d’une insuffisance
ou d’une aplasie de la moelle, qui peut
être héréditaire (agranulocytose),
• ou acquise comme dans certaines
infections virales (rougeole, rubéole), ou
bactériennes (typhoïde, brucellose),
• après une intoxication (benzol,
radiation, médicaments, insecticides
herbicides)
S/Abdessemed

13. S/Abdessemed